RESUMO A saúde das sementes é um dos fatores mais importantes que afetam a qualidade das sementes de grão-de-bico (Cicer arietinum). O presente estudo tem como objetivo comparar e identificar melhores métodos de incubação para a detecção de Ascochyta rabiei associada a sementes de grão-de-bico. Quatro protocolos foram comparados em sua sensibilidade para detectar A. rabiei: T1) Incubação em substrato de papel ou método do papel de filtro (“blotter test”) sem desinfecção superficial, T2) Botter test através da técnica de restrição de água, T3) Teste de placa com PDA e T4) Teste de placa com MEA. Quatro lotes de sementes de grão-de-bico independentes, naturalmente infectados com A. rabiei, foram amostrados na província de Córdoba e quatro na província de Buenos Aires, Argentina. No total, cada tratamento foi aplicado a um total de 400 sementes de cada localidade, para que os métodos sejam comparáveis. O T2 e T3 foram estatisticamente mais sensíveis para detectar sementes de Córdoba infectadas com A. rabiei. Apenas estes dois tratamentos foram repetidos com sementes da província de Buenos Aires, onde o T3 se mostrou mais sensível, por isso é recomendado para as rotinas de análise sanitária das sementes de grão-de-bico.

ABSTRACT Seed health is one of the most important factors affecting the quality of chickpea (Cicer arietinum) seeds. The present study aimed to compare and identify the best incubation methods for detecting Ascochyta rabiei associated with chickpea seeds. Four protocols were compared for their sensitivity in detecting A. rabiei: T1) Incubation on paper substrate or filter paper method (blotter test) without surface disinfection, T2) Blotter test through the water restriction technique, T3) PDA plate test, and T4) MEA plate test. Four independent chickpea seed lots, naturally infected with A. rabiei, were sampled from Córdoba Province and other four were sampled from Buenos Aires Province, Argentina. Each treatment was applied to a total of 400 seeds from each locality for the methods to be comparable. T2 and T3 were statistically more sensitive in detecting A. rabiei-infected seeds from Córdoba. Only these two treatments were repeated for seeds from Buenos Aires Province, and T3 proved to be more sensitive; thus, it is recommended for routine sanitary analysis of chickpea seeds.

The main objectives of this work were to isolate and identify the causal agents of sudden death syndrome (SDS) from samples collected in different Argentinean localities, to quantify its incidence, and to estimate yield losses. Two hundred and fifteen roots from plants with typical SDS foliar symptoms were analyzed. In order to perform pathogenicity tests, two bioassays were conducted in the greenhouse. Yield losses were estimated in a field trial located in Pergamino by quantification and comparison of yield of paired samples. Thirty-six percent of total roots (78 roots) presented signs of Fusarium, compatible with signs caused by SDS. Morphological studies allowed the identification of 35 isolates as F. tucumaniae and 18 as F. virguliforme. Other eight isolates could not be identified. All isolates that were inoculated reproduced typical SDS foliar symptoms. Significant differences were observed between healthy and diseased plants for 1000-grain weight and between potential and real yield (p<0.05). Average yield loss was 1514 kg/ha (range 192-3770 kg/ha). These results corroborated the distribution and predominance of F. tucumaniae and F. viguliforme in the area under study and its destructive potential.

Los objetivos de este trabajo fueron aislar e identificar los agentes causales del síndrome de la muerte súbita (SMS) en muestras provenientes de diferentes localidades de Argentina, y cuantificar la incidencia de la enfermedad y los daños causados a campo en el rendimiento. Se analizaron 215 raíces provenientes de plantas con síntoma foliares típicos de SMS para el aislamiento e identificación de los agentes causales. Para realizar las pruebas de patogenicidad se efectuaron dos bioensayos en invernáculo. Los daños fueron estimados en un ensayo a campo situado en Pergamino a través de la cuantificación del rendimiento de muestras apareadas. El 36% (78 raíces) de las raíces presentó signos de Fusarium, compatibles con los causantes de SMS. Los estudios morfológicos realizados permitieron identificar 35 aislamientos como F. tucumaniae y 18, como F. virguliforme. Otros ocho aislamientos no pudieron identificarse. Todos los aislamientos inoculados reprodujeron los síntomas foliares típicos de SMS. Se observaron diferencias entre el peso de mil granos de plantas sanas y de plantas enfermas y entre el rendimiento potencial y el real (p<0,05). Los daños promedio fueron de 1514 kg/ha (rango 192-3770 kg/ha). Los resultados obtenidos corroboraron la distribución y predominio de F. tucumaniae y F. viguliforme en el área estudiada y su potencial destructivo.

Fusarium tucumaniae e F. virguliforme são agentes etiológicos primários da síndrome da morte súbita (sudden death syndrome - SDS) de soja na Argentina e nos Estados Unidos, respectivamente. Cinco isolados de F. tucumaniae e quatro isolados de F. virguliforme foram testados para agressividade relativa à soja, usando-se o método de ponta de palito de dente e duas versões do método de inoculação com solo infestado. A cultivar de soja parcialmente resistente RA629 e a cultivar suscetível A6445RG foram inoculadas separadamente com cada um dos nove isolados. Dois experimentos para cada método de inoculação foram realizados. A análise da variância identificou uma interação tripla significativa entre cultivar*experimento*patógeno SDS (P = 0,01), usando-se os três métodos. Quando os métodos de infestação de solo foram utilizados, F. virguliforme foi mais agressivo que F. tucumaniae. Entretanto, quando foi usado o método do palito de dente, isolados de F. virguliforme e F. tucumaniae foram igualmente agressivos. Embora os três métodos testados tenham discriminado níveis de resistência parcial dos genótipos à SDS, resultados do presente estudo indicam que inoculações no solo com grãos de sorgo infestados representam o melhor método para avaliação de resistência de cultivares de soja à SDS. A existência de interações entre o hospedeiro, patógeno e condições de ambiente destaca a necessidade de estudos adicionais para melhorar a reprodutibilidade de testes de seleção de germoplasmas de soja para resistência à SDS.

Fusarium tucumaniae and F. virguliforme are the primary etiological agents of sudden-death syndrome (SDS) of soybean in Argentina and the United States, respectively. Five isolates of F. tucumaniae and four isolates of F. virguliforme were tested for relative aggressiveness to soybean, using a toothpick inoculation method and two versions of a soil infestation inoculation method. Partially resistant soybean cultivar RA629 and susceptible cultivar A6445RG were inoculated separately with each of the nine isolates. Two experiments for each inoculation method were performed. Analysis of variance identified a significant three-way interaction of soybean cultivar*experiment*SDS pathogen (P = 0.01) using the different methods. When the two soil infestation methods were used, F. virguliforme was more aggressive than F. tucumaniae; however, when using the toothpick method, isolates of F. virguliforme and F. tucumaniae were equally aggressive. Although all three methods discriminated levels of partial resistance of the genotypes to SDS, results of the present study indicated that soil inoculations with sorghum infested grain represent the best method for evaluating soybean cultivar resistance to SDS. The existence of interactions among the host, pathogen and environmental conditions highlights the need for additional studies to improve the reproducibility of tests for screening soybean germplasm for resistance to SDS.